米国薬局方-国民医薬品集のGENERAL CHAPTERS「<121.1> PHYSICOCHEMICAL ANALYTICAL PROCEDURES FOR INSULINS（インスリンの物理化学的分析手順）」に収載されている「LIMIT OF HIGH MOLECULAR WEIGHT PROTEINS」では、L20の充てん剤を充てんしたカラムが用いられています。本GENERAL CHAPTERSの対象はヒトインスリン、各種インスリン類似体、および動物由来インスリンです。2023年6月現在の対象モノグラフを以下に示します。ここでは、L20対応カラムであるPROTEIN KW-802.5を用いてウシインスリンの分析を行ったところ、すべてのシステム適合性の要件を満たすことが確認できました。

システム適合性溶出時間 (Resolution solution)
  インスリン多量体：13 ~ 17分
  インスリン二量体：約17.5分
  インスリン単量体：18 ~ 22分
  塩類：インスリン単量体の後に溶出
ピークバレー比* (Resolution solution)：2.0以上

*インスリン二量体ピークの高さとインスリン二量体ピークとインスリン単量体ピークの間の谷の高さの比率

Sample: 100 µL
(Resolution solution) 4.0 mg/mL of Insulin bovine containing dimer in 0.01 N HCl aq. (prepared according to USP-NF method)

1. 1.High molecular weight proteins
2. 2.Insulin dimer
3. 3. Insulin monomer