根据EP标准分析促红细胞生成素 (LW-803)

促红细胞生成素是一种由165个氨基酸组成的糖蛋白(分子量约30,600),它作为一种激素作用于骨髓的造血干细胞,促进红细胞的分化。其制剂用于治疗肾性贫血等疾病。欧洲药典(EP 9.6*)中,对于「促红细胞生成素浓缩液(Erythropoietin concentrated solution)」的「分子量大于促红细胞生成素的二聚体及相关物质」,规定使用适合分离蛋白质分子量在20,000到200,000之间的亲水性硅胶柱。使用水相SEC(GFC)柱PROTEIN LW-803进行分析,确认可以满足所有系统适应性要求。

系统适应性参考溶液**的单体峰面积:分辨率溶液的单体峰面积的1.5 ~ 2.5 %
促红细胞生成素的二聚体与单体的分离度(Resolution solution):1.5以上

*数据采集时的版本
**将20 µL的分辨率溶液稀释至1.0 mL的洗脱液中。

Sample: 100 µL
(Resolution solution) 0.2 mg/mL of Erythropoietin for SEC system suitability CRS  in eluent

  1. 1.Dimer
  2. 2.Monomer
Column
:Shodex PROTEIN LW-803 (8.0 mm I.D. x 300 mm)
Eluent
:1.15 g/L Na2HPO4 + 0.2 g/L KH2PO4 + 23.4 g/L NaCl aq.  (adjusted to pH7.4 with H3PO4 or NaOH)
Flow rate
:0.5 mL/min
Detector
:UV (214 nm)
Column temp.
:25 ℃

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