食物繊維は、脂質異常症予防、便秘予防、肥満予防などの効能を持ちます。難消化性デキストリンは日本で1991年にスタートした特定保健用食品(トクホ)の関与成分とされています。難消化性デキストリンのような低分子水溶性食物繊維を多く含む試料の分析には、酵素-HPLC法が用いられています。トクホ制度の規格基準には難消化性デキストリンの定量法として一連の前処理を行った試料をHPLCに供し、食物繊維画分と内部標準試料であるグリセリンのピーク面積の比率を求める方法が記載されています。ここでは、市販の難消化性デキストリン含有飲料を前処理した後、トクホ制度の規格基準に記載されている手順を参考に水系SEC用カラム水系SEC用カラムOHpak LB-802.5を用いて難消化性デキストリンを分析しました。なお、前処理方法はトクホ制度規格基準記載と一部異なります。
※「食品表示基準」に倣い、クロマトグラム中の赤い点線の位置(マルトトリオースの溶出位置)よりも保持が弱いものを低分子水溶性食物繊と定義します。
- 1.飲料試料5 mLに0.08 M リン酸緩衝液 (pH6.0)を45 mL加えて混合する。
- 2.α-アミラーゼを0.2 mL加えた後、pH が 6.0 ± 0.5 であることを確認する。※本試料はpH6.3であることを確認した。
- 3.沸騰水浴中に入れ、90 ℃で30分振とうしながら反応させる。
- 4.冷却後、プロテアーゼ溶液とアミログルコシダーゼ溶液を0.2 mLずつ加えた後、pH が 6.0 ± 0.5 であることを確認する。※本試料はpH6.3であることを確認した。
- 5.60 ℃で30分振とうしながら反応させる。
- 6.沸騰水浴中に入れ、100 ℃で10分加熱する。
- 7.冷却後、水で10希釈したグリセリンを3 mL加える。
- 8.水で100 mLに定容し、酵素処理液とする。
- 9.酵素処理液 50 mLを50 mL/hで*イオン交換樹脂に通液する。
*アンバーライト™ IRA-67 とアンバーライト™ 200CT(デュポン社製)を25 mLずつ混合 - 10.No.9のイオン交換樹脂に水を約150 mL通液する。(全流出液:200 mL)
- 11.ロータリーエバポレーターにて濃縮する。
- 12.水にて20 mLに定容する。
- 13. 0.45μm のメンブランフィルターでろ過し、HPLC試料とする。
Sample: 20 μL
Pretreated beverage containing indigestible dextrin
- 1.Dietary fiber fraction
- 2.Glucose
- 3.Glycerin (Internal standard)
- Column
- :Shodex OHpak LB-G 6B (6.0 mm I.D. x 100 mm) + LB-802.5 (8.0 mm I.D. x 300 mm) x 2
- Eluent
- :H2O
- Flow rate
- :0.5 mL/min
- Detector
- :RI
- Column temp.
- :80 ℃
試料名インデックス
製品名インデックス
アプリケーションデータ
- Pullulan、PEOのSEC/MALS
- ヘパリンのキャラクタリゼーション (SB-803 HQ)
- ヘパリン (1) (SB-804 HQ)
- ヘパリン (2) (SB-806M HQ)
- ヘパリン (3) (KW-804)
- ヘパリンの絶対分子量測定 (LB-806M)
- SEC/MALSによる低分子ヘパリンの絶対分子量測定
- 低分子ヘパリンのSEC分析 (1) (ダルテパリンナトリウム) (KW-803 + KW-802.5)
- 低分子ヘパリンのSEC分析 (2) (パルナパリンナトリウム) (KW-803 + KW-802.5)
- エノキサパリンナトリウムの分析 (KW-803 + KW-802.5)
- コーンスターチ (1) (水溶媒) (SB-806M HQ)
- コーンスターチ (2) (DMSO/DMF溶媒) (SB-806 HQ)
- コーンスターチ (3) (DMSO/DMF溶媒 KD-806M)
- ヒアルロン酸 (1) (SB-805 HQ)
- ヒアルロン酸 (2) (SB-806M HQ)
- ヒアルロン酸 (4) (SB-807 HQ)
- ヒアルロン酸のSEC/MALS (濃度依存性)
- コンドロイチン硫酸 (SB-806M HQ)
- コンドロイチン硫酸A (KS-804)
- コンドロイチン硫酸ナトリウム (KS-804 + KS-801)
- キトサン (SB-806M HQ)
- プルランとオリゴ糖 (KS-804)
- プルラン、糖とエタノール (KS-802)
- アミロース (KS-802)
- デンプン加水分解物 (1) (KS-802)
- イヌリン (2) (SB-806M HQ)
- ムチン (SB-806M HQ)
- ペクチン (SB-806M HQ)
- グリコーゲン (2) (SB-806M HQ)
- アルギン酸ナトリウム (SB-806M HQ)
- アルギン酸ナトリウムの絶対分子量測定 (LB-806M)
- カラギーナン (SB-806M HQ)
- ケラタン硫酸 (SB-806M HQ)
- カルボキシメチルセルロース (3) (SB-806M HQ)
- カルボキシメチルセルロース (4) (SB-806M HQ)
- ヒドロキシエチルセルロース (3) (SB-806M HQ)
- ヒドロキシエチルセルロース (4) (SB-806M HQ)
- 片栗粉 (DMSO/DMF溶媒 KD-806M)
- SECカラムを用いたシアノバクテリア由来グリコーゲンの分析 (SB-806M HQ)
- 標準プルラン (8) (LF-804)
- キシラン (LF-804)
- セルロース (KD-806M)
- 標準プルラン (1) (SB-804 HQ)
- 標準プルラン (2) (GF-310 HQ)
- 標準プルラン (4) (流量の影響) (SB-2002.5)
- 標準プルラン (5) (温度の影響) (SB-2002.5)
- 標準プルラン (7) (GS-220 HQ)
- デキストラン (1) (SB-805 HQ)
- デキストラン (2) (DMSO溶媒) (KF-806M)
- デキストラン (3) (SB-806M HQ)
- デキストラン硫酸ナトリウム (SB-806M HQ)
- メチルセルロース (SB-806M HQ)
- ヒドロキシプロピルセルロース (SB-806M HQ)
- ヒドロキシプロピルメチルセルロース (SB-806M HQ)
- アラビアゴム (SB-806M HQ)
- グアーガム (SB-806M HQ)
- USP-NFに準拠したグアーガムの分析 (SP0810)
- フコイダン (SB-806M HQ)
- ラミナリン (SB-806M HQ)
- 難消化性デキストリン粉末の分析 (LB-802.5)