OHpak SB-800 HQ、LB-800系列的分离条件

非离子性亲水性样品和离子性亲水性样品

盐溶液和缓冲液经常被用来作为流动相。典型的代表有以下几种:
盐溶液----氯化钠水溶液、硝酸钠水溶液、硫酸钠水溶液、硫酸钙水溶液、硫酸铵水溶液
缓冲液----磷酸缓冲液、三盐酸缓冲液、醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液 添加盐的浓度为0.05~0.3 M。

(注意)
  • (1)pH值范围请控制在3.0~10.0。
  • (2)如果流动相中含有氯离子,则流动相的pH请高于6。
  • (3)可使用的溶剂最大盐浓度为0.5 M。
  • (4)不推荐使用硼酸缓冲液是因为填料中的基团会和硼酸发生反应。

非离子性疏水性样品和离子性疏水性样品

为了抑制疏水性样品的疏水性吸附,推荐在流动相中加入有机溶剂。另外,离子性的样品还需添加盐溶液。
可以添加的有机溶剂,请参考: 聚合物基质水溶性SEC(GFC)色谱柱: OHpak SB-800 HQ多角度光散射检测器用聚合物基质水溶性SEC(GFC)色谱柱: OHpak LB-800

(注意)
色谱柱中的流动相置换成含有机溶剂的流动相时,流速请控制在0.5 mL/min以下。
使用DMSO时,流速必须控制在0.3 mL/min以下并且色谱柱温度必须高于50 ℃。

蛋白质样品

尿素和6M胍的水溶液可以作为蛋白质的变性剂而用作流动相。膜蛋白质这类的在水中溶解性很小的样品,在溶剂中添加SDS或Brij-35等表面活性剂,效果很好。

(注意)
因为需要使用浓度较高的变性剂,如果色谱柱的溶剂频繁更换,可能会缩短色谱柱寿命。所以,推荐使用专用的色谱柱。

 

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