美国药典对盐酸氨基葡萄糖的分析规定使用符合L8规定的填料(键合氨丙基的硅胶基质),但硅胶基质色谱柱在耐久性方面经常存在问题。如下进行了聚合物基质氨基柱Asahipak NH2P-50 4D和一般硅胶柱的耐久性比较。硅胶氨基色谱柱在使用了200次左右开始劣化,300次以后急剧劣化。而NH2P-50 4D进样3000次后理论塔板数、拖尾因子没有明显变化,耐久性优异。
【注意】本实验色谱柱需要事先平衡。
色谱柱平衡:60 mM 磷酸水溶液使用0.5 mL/min流速通液15分钟后,再用流动相使用分析时的流速通液3小时。
Sample : 3.8 mg/mL Glucosamine hydrochloride (in H2O/CH3CN=1/1), 10 μL
1. Glucosamine
Columns : Shodex Asahipak NH2P-50 4D (4.6 mm I.D. x 150 mm) Silica-based amino column from other manufacturer (4.6 mm I.D. x 150 mm) Eluent : *Buffer (pH7.5)/CH3CN=30/70 (NH2P-50 4D) *Buffer (pH7.5)/CH3CN=25/75 (Silica-based amino column) Flow rate : 0.9 mL/min (NH2P-50 4D) 1.5 mL/min (Silica-based amino column) Detector : UV (195 nm) Column temp. : 35 ℃ *Buffer ; In a 1-L volumetric flask, dissolve 3.5 g K2HPO4 in water. Add 0.25 mL Ammonium hydroxide (25 %), dilute with water to volume, and mix. Adjusted with H3PO4 to a pH7.5
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