肽图分析是生物类药物的确认试验之一。所谓肽图分析，即生物类药物经由酶消化使得肽裂解为小片段，通过反相色谱分离，进行一级构造分析。用于UHPLC的硅胶反相色谱柱C18U系列是使用亚微米有机二氧化硅杂化颗粒作为填料，具有优秀分离度和机械强度的色谱柱。以下应用利用C18U系列色谱柱的高分离性能，使用C18U 2D分析抗体药物的胰蛋白酶消化物，确认了各种消化肽的峰。抗体药物的胰蛋白酶消化物是市售的利妥昔单抗（抗CD20单克隆抗体）制剂通过固定化胰蛋白酶的蛋白质消化试剂盒进行酶消化取得的。


Sample : 5 μL
Tryptic digest of Rituximab formulation
(Injection solution)
0.5 mg/mL

Column       : Shodex C18U 2D (2.0 mm I.D. x 150 mm)
Eluent       : (A); 0.1 % TFA in H2O (B); 0.1 % TFA in CH3CN
               Linear gradient:
               (B %) 10 to 40 % (0 to 25 min), 40 % (25 to 30 min), 90 % (30 to 35 min)
Flow rate    : 0.2 mL/min
Detector     : UV (220 nm) (small cell volume)
Column temp. : 40 ℃