不使用离子对试剂分析低级胺

HPLC分析低级胺等碱性物质时,一般使用离子交换色谱柱或使用ODS色谱柱并使用离子对试剂。上述方法都是利用碱性物质样品的分离度和疏水性的差异来分离的。尤其是使用ODS色谱柱并使用离子对试剂时,涉及到下面所介绍的2种分离模式,分离的调整非常复杂。

1) 模式 1
因为样品和离子对试剂会形成离子对,随着离子与填料的相互作用减弱,离子对试剂的碳链使样品的疏水性变高,样品能被色谱柱保留下来。
R-NH3(+) + ion pair reagent(-) = [R-NH3(+)(-) ion pair reagent]

2) 模式 2
离子对试剂的碳链疏水性强,由于疏水的部分会吸附在ODS色谱柱上,ODS色谱柱的分离原理是离子交换模式。相反,聚合物基质反相色谱柱 ODP2 HP, Asahipak ODP 和 RSpak DE 系列等有下列特长。
a) 流动相的pH值设定在10 ~ 11时,可以反相分析低级胺。
b) 此外,在碱性条件下,低级胺的峰会更加尖锐。
c) ODP 和DE 系列的色谱柱pH值的使用范围是2 ~ 11。

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