日本2018年《药品添加剂标准》中对纯化甜菊提取物的定量方法中规定，选用氨丙基甲硅烷基化硅胶填充的色谱柱，调节流速使甜菊糖的保留时间在10分钟左右。系统适用性要求按照红参皂甙、苦甙A、甜菊糖、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙A的顺序洗脱，苦甙与莱鲍迪甙C的分离度为1.5以上，每20 µL苦甙标准溶液，进行6次重复性实验，峰的相对标准偏差≤1.5% 。使用聚合物基质氨基柱 HILICpak VG-50 4E 不仅满足系统适用性和重现性要求，而且使用的流速设置比硅胶基氨基柱还小一半，因此溶剂用量是硅胶基氨基柱的 1/2 或更少。此外，基于聚合物基质氨基柱比硅胶氨基柱耐久性更强，使用VG-50 4E分析此案例非常合适。


Standard solution
Sample: 20 µL
1. Rubusoside  0.003 %
2. Dulcoside A  0.003 %
3. Stevioside  0.01 %
4. Rebaudioside C  0.003 %
5. Rebaudioside A  0.005 %

Stevioside standard solution
Sample: 20 µL
3. Stevioside  0.05 %

Column       : Shodex HILICpak VG-50 4E (4.6 mm I.D. x 250 mm)
Eluent       : H2O/CH3CN=20/80
Flow rate    : 0.65 mL/min
Detector     : UV (213 nm)
Column temp. : 35 ℃