在流动相PH值不同的条件下,不同的蛋白质和多肽得以分离。酸性条件下 (pH2.3, pH3.0), Leu-脑啡肽 和 Leu-Trp-Met 有很强的保留,洗脱时间非常接近,因此分离不是很理想。相反,在碱性条件下(pH10)下,Asahipak ODP能够快速优异得分离这些物质,并且峰形尖锐。此外,在碱性条件下,ODP色谱柱理论塔板数高。
请参考 酸性和碱性流动相下多肽的分析 (ODP-50 6D)
Sample:
- 1.Glu-Gly-Phe
- 2.Met-Enkephalin
- 3.Leu-Enkephalin
- 4.Leu-Trp-Met
No. | Theoretical plate number | |||
---|---|---|---|---|
pH2.3 | pH3.0 | pH6.7 | pH10 | |
1 | 6100 | 1100 | 3800 | - |
2 | 7400 | 1100 | 4700 | 5700 |
3 | 7600 | 600 | 3800 | 6700 |
4 | 6100 | 500 | 2400 | 8000 |
- Column
- :Shodex Asahipak ODP-50 6D (6.0 mm I.D. x 150 mm)
- Eluent
- :Solution/CH3CN=85/15
(pH2.3) 0.05 % TFA aq.
(pH3.0) 50 mM Acetic acid aq.
(pH6.7) 50 mM Ammonium acetare buffer
(pH10.0) 50 mM Ammonium acetare buffer - Flow rate
- :1.0 mL/min
- Detector
- :UV (220 nm)
- Column temp.
- :30 ℃