流动相pH的影响 (ODP-50 6D)

在流动相PH值不同的条件下,不同的蛋白质和多肽得以分离。酸性条件下 (pH2.3, pH3.0), Leu-脑啡肽 和 Leu-Trp-Met 有很强的保留,洗脱时间非常接近,因此分离不是很理想。相反,在碱性条件下(pH10)下,Asahipak ODP能够快速优异得分离这些物质,并且峰形尖锐。此外,在碱性条件下,ODP色谱柱理论塔板数高。
请参考 酸性和碱性流动相下多肽的分析 (ODP-50 6D)

Sample:

  1. 1.Glu-Gly-Phe
  2. 2.Met-Enkephalin
  3. 3.Leu-Enkephalin
  4. 4.Leu-Trp-Met
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No. Theoretical plate number
pH2.3 pH3.0 pH6.7 pH10
1 6100 1100 3800 -
2 7400 1100 4700 5700
3 7600   600 3800 6700
4 6100   500 2400 8000
Column
Shodex Asahipak ODP-50 6D (6.0 mm I.D. x 150 mm)
Eluent
Solution/CH3CN=85/15
(pH2.3) 0.05 % TFA aq.
(pH3.0) 50 mM Acetic acid aq.
(pH6.7) 50 mM Ammonium acetare buffer
(pH10.0) 50 mM Ammonium acetare buffer
Flow rate
1.0 mL/min
Detector
UV (220 nm)
Column temp.
30 ℃
 

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