使用反相色谱柱(尤其是ODS柱)来分析多肽，总是存在一个低回收率的问题。然而使用Asahipak ODP-60 4D在分析高、中、 低分子量的多肽及酸性、中性和碱性多肽时有一个高回收率。在等度淋洗条件下，一些宽分布的不同特性的多肽的回收率如下。 这些样品通过等度洗脱可以得到很高的分辨率。
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| Substances (1 μg each) | MW | pI | HP | Recovery (%) | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Eluent A | Eluent C | Eluent C | |||||
| Glu-Gly-Phe | peptideic peptide | 351 | 3.29 | 2.17 | 96 | 103 | 88 |
| Substance P Frg.1-4 | Basic peptide | 497 | 11.44 | 3.24 | 100 | 100 | 110 |
| Met-Enkephalin | Neutral peptide | 574 | 5.90 | 5.02 | 96 | 96 | 99 |
| Des-Arg9-Bradykinin | Basic peptide | 904 | 11.05 | 7.65 | - | 98 | 102 |
| Substance P | Basic peptide | 1348 | 12.00 | 8.61 | - | 90 | 105 |
| α-Endorphin | Neutral peptide | 1684 | 6.85 | 6.94 | - | 96 | 100 |
| β-Endorphin | Basic peptide | 3465 | 9.93 | 16.80 | - | - | 100 |
| Insulin B chain S-sulphonate | Neutral peptide | 3496 | 6.05 | 24.05 | - | - | 97 |
| Big gastrin (Human) | peptideic peptide | 3749 | 4.32 | 23.53 | - | - | 95 |
- PI: Isocratic point
HP: Hydrophorbic Parameter
- Column
- ：Shodex Asahipak ODP-50 6D (6.0 mm I.D. x 150 mm)
- Eluent
- ：(A); 0.05 % TFA aq./CH3CN=85/15
(B); 0.05 % TFA aq./CH3CN=80/20
(C); 0.05 % TFA aq./CH3CN=70/30 - Flow rate
- ：1.0 mL/min
- Detector
- ：UV (220 nm)
- Column temp.
- ：30 ℃