Size Exclusion (SEC, 크기배제)

(1) 크기 배제의 기본 원리

  • 크기배제크로마토그래피(SEC)는 이론적으로 ‘어떠한 화학적 상호작용 없이 컬럼 내 Pore를 이용하여 물리적인 방식으로 분리하는 크로마토그래피’를 칭함.
    따라서 Gel Pore에 조금 더 오랫동안 머물 수 있는 분자량이 작은 샘플이 가장 나중에 용출.

(2) 크기 배제 분리시 발생할 수 있는 화학적 상호작용

  • 일반적으로 유기용매 GPC의 경우 화학적 상호작용이 거의 없이 SEC의 원리로 분석이 진행 단, 수용성 SEC의 경우에는 실제로 분석 시 다양한 화학적 상호작용이 작용.
    SEC 분석에 영향을 미치는 인자는 아래와 같음.
    • 컬럼 Gel과 샘플과의 화학적 상호작용
      • 친수성 상호작용
        소수성 상호작용
    • 컬럼 Gel과 샘플과의 이온적 상호작용
      • 흡착
        배제
    • 컬럼 Gel의 Functional group에 따른 화학적 상호작용
      • Silica-Diol gel
        SDB-(Negative charge를 가지는 group) Gel
  • 위 현상을 방지하기 위하여 일반적으로 샘플과 이동상 성향에 맞추어 Salt를 첨가(GPC&GFC)하거나buffer(GFC)를 첨가, 이동상 조성 변화를 실시

(3) 크기 배제 컬럼의 종류

(4) 각 당류에 따른 적합한 컬럼 예시

우 스크롤이 가능합니다
샘플 종류 컬럼 분석 사례
저분자 다당류 Asahipak GS-220 HQ
고분자 다당류 OHpak SB-806M HQ
올리고당 SUGAR KS-801

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