补充剂中蛋白聚糖的分析 (SB-806M HQ)

蛋白聚糖是一种由蛋白质和糖胺聚糖结合而成的糖蛋白,存在于人体和动物软骨中。蛋白聚糖可促进皮肤细胞的生长以及透明质酸和胶原蛋白的生成。蛋白聚糖本身还具有很强的锁水能力,期待其对皮肤起到抗衰老作用,缓解关节炎症状和抑制炎症,可用于功能性食品和化妆品中。以下是使用水溶性SEC色谱柱 OHpak SB-806M HQ 分析经过前处理的市售保健品中的蛋白多糖的应用实例。校准曲线线性良好,回收率接近 100%。

样品前处理

  1. 用研钵捣碎保健品,称量270 mg。
  2. 加入 15 mL 浓度为4 M的盐酸胍溶液。
  3. 超声提取 15 分钟后,离心(约1800 x g,10 分钟)并收集上清液。
  4. 对残留物重复步骤②至③两次。
  5. 收集④ 中得到的上清液并进行超滤。 (截留分子量:50,000-100,000,约 2400 x g,离心 30 分钟)
  6. 向未通过超滤膜的蛋白多糖部分加入 5 mL 水,再次离心(约 1800 x g,10 分钟)。 重复此过程五次,清洗蛋白多糖馏分。
  7. 向蛋白多糖馏分中加入流动相,定容至20 mL。
  8. 用 0.45 µm 滤膜过滤,制成样品溶液。

Sample: 50 µL
Proteoglycan standard solution (0.1 mg/mL)
Pretreated supplement extract solution

  1. 1.Proteoglycan
Proteoglycan_chromatogram
Proteoglycan_calibration curve
Column
Shodex OHpak SB-G 6B (6.0 mm I.D. x 100 mm) + SB-806M HQ (8.0 mm I.D. x 300 mm)
Eluent
25 mM KH2PO4 + 25 mM Na2HPO4 aq.
Flow rate
0.5 mL/min
Detector
RI
Column temp.
40 ℃

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