有时在抗体药物中加入少量表面活性剂防止IgG的聚集和吸附，并且表面活性剂的浓度控制对于质量控制非常重要。以下是使用聚合物基质反相色谱柱ODP2 HP-4D，配合蒸发光(ELS)检测器，不进行前处理，分析市售抗体药物中聚山梨醇脂 80(产品名：吐温 80)的应用实例。碱性条件下IgG无法被色谱柱保留直接被洗脱，吐温 80由于反相模式的作用被色谱柱保留。所以，可以不进行前处理（除蛋白），完全分离吐温80及IgG。取4.3 ～ 5.5分钟的峰面积做标准曲线(对数-对数图)，在10 ~ 100 μg/mL的浓度范围可以得到直线性良好的标准曲线。50 μg/mL浓度添加回收率能达到93%。使用本方法只需稀释抗体药物即可进行HPLC分析，可以迅速高效的分析吐温80。
Sample: 50 µL
Commercial antibody-drug formulation
14-fold dilution with H2O
- Column
- ：Shodex ODP2 HP-4D (4.6 mm I.D. x 150 mm)
- Eluent
- ：(A); 0.1 % NH3 aq./(B); CH3CN
Low pressure linear gradient; (B %) 20 % to 80 % (0 to 5 min), 80 % (5 to 6 min), 80 to 20 % (6 to 6.01 min), 20 % (6.01 to 10 min) - Flow rate
- ：1.0 mL/min
- Detector
- ：ELSD
- Column temp.
- ：40 ℃
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应用实例
- 壬基酚聚氧乙烯醚 (1) (GF-310 HQ)
- IGEPAL® CA-210 (聚氧乙烯(2) 异辛基苯基醚) (KF-402HQ)
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- Brij® 30 (聚氧乙烯(4) 十二烷基醚) (2) (KF-402HQ)
- Brij® 52 (聚氧乙烯(2) 十六烷基醚) (KF-402HQ)
- Brij® 56 (聚氧乙烯(10) 十六烷基醚) (GF-310 HQ)
- 有机溶剂浓度的影响 (1) (GF-310 HQ)
- 有机溶剂浓度的影响 (2) (GF-310 HQ)
- 有机溶剂种类的影响 (GF-310 HQ)
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- 温度的影响 (GF-310 HQ)
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- 和ODS色谱柱的比较 (2)
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- Triton X-100 (GF-310 HQ)
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