使用水溶性/油溶性两用色谱柱Asahipak GF-310 HQ,改变流动相中甲醇/水的组成分析PEG(MW: 20000, 4000, 1000, 400)和乙二醇 的混合物。使用100%水作为流动相的时候,样品的洗脱速度比使用甲醇/水作为流动相时慢。这是由于GF-310 HQ的填料具有疏水性。GF-310 HQ的填料既有疏水性基团又有亲水性基团。单单是用水作为流动相时,填料的极性和水的极性关系图请参考图2。在这种条件下,PEG的疏水性部分和填料的疏水性部分发生疏水性相互作用,疏水性高的样品洗脱变慢。 PEG(MW:20000)是无法进入填料孔穴的分子,所以被填料的孔穴排阻,和填料的接触面积变小,几乎不发生疏水性相互作用无法被色谱柱保持。然后,流动相中添加甲醇后,流动相的极性和填料的极性相近,PEG和填料的疏水性作用会被抑制,使用尺寸排阻法进行分离。增加甲醇的量甚至使用100%甲醇做流动相,那么填料和流动相的极性反而变成了正相模式。样品的极性部分和填料的极性部分发生相互作用,极性高的样品晚被洗脱。使用THF作为流动相时,正相模式的作用更强了,PEG混合物的洗脱变的更慢了。
请参考 GS-320 HQ色谱柱流动相组成对PEG混合物洗脱的影响。
Sample : 0.1 % each, 100 μL
1. Poly(ethylene glycol) (MW: 20,000)
2. Poly(ethylene glycol) (MW: 4,000)
3. Poly(ethylene glycol) (MW: 1,000)
4. Poly(ethylene glycol) (MW: 400)
5. EG, Ethylene glycol
Column : Shodex Asahipak GF-310 HQ (7.5 mm I.D. x 300 mm) Detector : RI Column temp. : 30 ℃
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