使用聚合物基质反相色谱柱Asahipak ODP-50 4D可以分离5种代表性不饱和脂肪酸，且在1 ~ 100 μg/mL的浓度范围内能得到直线性良好的标准曲线。对含有ω-3系脂肪酸EPA和DHA的市售营养补充剂进行分析，可以得到超过90%的回收率，适合定量分析。不饱和脂肪酸洗脱后提高流动相中乙腈的比例，可以把营养补充剂中的高疏水性物质洗脱出来。

(市售营养补充剂样品溶液的配制方法)
(1) 取营养补充剂(软胶囊)内容物
(2) 样品10 mg加2 mL乙醇溶解
(3) 过0.45 μm滤膜


Sample : 5 µL
Standard 20 μg/mL each
(in Ethanol)
1. EPA (Eicosapentaenoic acid)
2. α-Linolenic acid
3. DHA (Docosahexaenoic acid)
4. Arachidonic acid
5. Linoleic acid

Column       : Shodex Asahipak ODP-50 4D (4.6 mm I.D. x 150 mm)
Eluent       : （A) 0.1 % H3PO4 in (H2O/CH3CN=35/65)/(B) CH3CN
                Step gradient ;
                (B %) 0 % (0 to 20 min), 0 % to 100 % (20 to 20.01 min), 
                      100 % (20.01 to 30 min). 100 % to 0 % (30 to 30.01 min), 
                      0 % (30.01 to 40 min)
Flow rate    : 1.0 mL/min
Detector     : UV (215 nm)
Column temp. : 40 ℃