流动相的pH在7.0 或8.0，五种蛋白质可以使用IEC SP-825 (强阳离子交换色谱柱)很好分离。降低PH值核糖核酸酶A的保留时间延长，PH低于6.0时，核糖核酸酶A在α-胰凝乳蛋白酶A之后洗脱出来。pH 6.0时，核糖核酸酶A与aα胰凝 乳蛋白酶A的分离不充分。当pH4.0或5.0时，肌红蛋白无法洗脱出来。


Sample : 1. Myoglobin, 2. Ribonuclease A, 3. α Chymotrypsinogen A, 4. Cytochrome c, 5. Lysozyme

Column    : Shodex IEC SP-825 (8.0 mm I.D. x 75 mm)
Eluent    : (A); 20 mM Sodium formate buffer (pH4.0)
                 20 mM Sodium malonate buffer (pH5.0 and 6.0)
                 20 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)
                 20 mM HEPES (pH8.0)
            (B); (A) + 0.5 M NaCl
            Linear gradient; 0 min to 20 min, (A) to (B)
Flow rate : 1.0 mL/min