糖鎖解析は精製されたタンパク質であっても含まれる糖鎖は不均一なこと、糖鎖特有の結合異性体や分岐構造を識別する必要性があることなど多くの課題があります。このような課題解決にHPLCは有効です。アフィニティモードによる分離、更にHILICモードによる二次元分離により様々な糖鎖が 分離定量されています。下記データは2-アミノ安息香酸(2AA)で誘導体化した糖鎖をポリマー系アミノカラムAsahipak NH2P-40 2Dを用いてHILICモードで分離しESI-TOF-MSで糖鎖の同定を行った例をご紹介します。
※Asahipak NH2P-40 2Dは販売を終了しております。代替品はAsahipak NH2P-50 2Dです。
Sample: 2 μL
Human IgG (1 μg protein)
2AA-labeled N-Glycan
- .
- Column
- ：Shodex Asahipak NH2P-40 2D (2.0 mm I.D. x 150 mm)
- Eluent
- ：(A); 95 % MeCN/0.1 % Formic acid, (B); 5 % MeCN/0.1 % Formic acid
Linear gradient; (B %) 30 % (0 - 2.5 min), 30 - 95 % (2.5 - 20 min) - Flow rate
- ：0.2 mL/min
- Detector
- ：ESI-TOF MS
(Polarity : Negative, Full MS range : 2000, CDL temp.: 190 ℃, Detector voltage: 1.7 kV, Neuburising gas: 1.5 L/min) - Column temp.
- ：45 ℃
近畿大学薬学部 木下充弘先生ご提供
試料名インデックス
製品名インデックス
アプリケーションデータ
- ピリジルアミノ化単糖類の分析 (NH2P-50 4E)
- ピリジルアミノ化糖鎖の分析 (NH2P-50 4E)
- 2-アミノ安息香酸誘導体化グルコースホモポリマーの分析 (NH2P-50 4E)
- 糖のLC/MS/MS分析 (NH2P-40 2D)
- 糖のLC/MS/MS分析 (VG-50 2D)
- リン酸化糖のLC/MS分析 (VT-50 2D)
- LC/MSによる糖、有機酸、アミノ酸の一斉分析 (VG-50 2D)
- LC/MSによる栄養ドリンク中の親水性化合物の一斉分析 (VG-50 2D)
- グルコースとグルコン酸のLC/MS分析 (VG-50 2D)
- N-アセチルキトオリゴ糖のLC/MS分析 (NH2P-40 2D)
- ノンシュガー飲料中糖類のLC/MS分析 (VG-50 2D)