強陽イオン交換カラムIEC SP-825を用いたタンパク質の分離におけるpHの影響を調べました。溶離液pHが7.0と8.0の場合は5種のタンパク質が良く分離されています。リボヌクレアーゼAの保持時間はpHが下がる程大きくなり、pH6.0以下ではαキモトリプシノーゲンAの後に溶出するようになります。pH6.0ではリボヌクレアーゼAとα-キモトリプシノーゲンAの分離が不充分になります。pH4.0と5.0ではミオグロビンがシャープに溶出していません。



Sample :
1. Myoglobin , 2. Ribonuclease A , 3. α-Chymotrypsinogen A , 4. Cytochrome c , 5. Lysozyme

Column    : Shodex IEC SP-825 (8.0 mm I.D. x 75 mm)
Eluent    : (A); 20 mM Sodium formate buffer (pH4.0)
                 20 mM Sodium malonate buffer (pH5.0 and 6.0)
                 20 mM Sodium phosphate buffer (pH7.0)
                 20 mM HEPES (pH8.0)
            (B); (A) + 0.5 M NaCl
            Linear gradient: 0 min to 20 min, (A) to (B)
Flow rate : 1.0 mL/min