弱陰イオン交換クロマトグラフィー用カラムIEC DEAE-825を用いたタンパク質の分離におけるpHの影響を調べました。酸性溶離液の場合、4種のタンパク質は良く分離しています。アルカリ性溶離液では分離が悪く、pHが上るに従い4本のピークは1本にまとまる傾向を示しています。これは充てん剤のイオン交換基がpHが高い状態では十分にイオンに解離しなくなるからです。


Sample : 100μL
1. Conalbumin 0.1%
2. Transferrin 0.2%
3. Ovalbumin 0.2%
4. Trypsin inhibitor 0.2%

Column       : Shodex IEC DEAE-825 (8.0 mm I.D. x 75 mm)
Eluent       : (A); 20 mM Piperazine-HCl buffer(pH6.0)
                    20 mM Bis-Tris-HCl buffer(pH7.0)
                    20 mM Tris-HCl buffer(pH8.0)
                    20 mM Ethanolamine-HCl buffer(pH9.0)
                    20 mM 1,3-Diaminopropane-HCl buffer(pH10.0)
               (B); (A) + 0.5 M NaCl
               Linear gradient: 0 min to 20 min, (A) to (B)
Flow rate    : 1.0 mL/min
Detector     : UV(280 nm)
Column temp. : 25 ℃