細胞培養上清由来ノロウイルスVLPをバイオナノプロダクト分析・精製用水系SEC（GFC）充てんカラム UB-50を用い、複数の検出器との組み合わせにより分析を行いました。
UV (280 nm)は、培養由来不純物全般、MALS散乱光(LS)は特にナノ粒子クラスの大型の対象に高感度なレスポンスを与えます。また、MALSからは対象の回転半径(RMS redius)の推定値が得られます。ここでは、形状やサイズなどよりダイレクトにVLPの形成が確認できる透過型電子顕微鏡(TEM)との比較も行いました。
TEM観察から良好なVLPの形成状況が確認でき、MALSの情報からも16分付近にTEMと合致する粒子サイズを確認しました。一方、今回使用したノロウイルスVLP試料は精製グレードですが、RMS半径の情報では正常VLPよりも大きな粒子（凝集体など）が存在すること、また、UVのプロファイルから低分子側に依然として生体由来不純物が残存することが示唆されました。
このようにUB-50は、主に50 nm以下のナノプロダクトの分析・精製においてターゲットのプロファイリングのみならず、その品質評価に重要な生体由来不純物との分離をも考慮した分離サイズ設計となっています。また、UB-50はラボ分取への利用などを見据え、26 µmの単分散粒子を採用により生体由来成分の高負荷下でのワークフローにも配慮した低圧運用を可能にしました。更に、高い再現性やキャリーオーバーの低減に不可欠なアルカリ洗浄に対応すべく、高アルカリ耐久性を兼ね揃えています。

微量・精密分析を主目的とする場合は水系SEC(GFC)用カラムOHpak SB-805 HQの分析例も参照ください。

Sample: 15 µL

Norovirus VLP purification grade

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