ヒト血漿由来エクソソーム(EV)をバイオナノプロダクト分析・精製用水系SEC(GFC)充てんカラムUB-100を用い、種々の検出器との組み合わせにより分析を行いました。 UV (280 nm)は生体由来不純物全般、蛍光 (FL; Ex 280 nm / Em 348 nm)は、主にタンパク質(Trp残基を指標とする)、MALS散乱光(LS)は特にナノ粒子クラスの大型の対象に高感度なレスポンスを与えます。また、MALSからは対象の回転半径(RMS redius)の推定値が得られます。
MALSの情報から13分付近がEVを主成分とする画分で、更にRMS半径の情報より分子サイズには分布があるとことが推定されます。一方、今回分析に使用したヒト血漿由来のEV試料は精製グレードですが、UV、FLのプロファイルからEV画分以外にもピークが確認されており、依然として不純物が著量に含まれていることが推定されます。
このようにUB-100は、EVをはじめとする主に50 nm以上のナノプロダクトの分析・精製においてターゲットのプロファイリングのみならず、その品質評価に重要な生体由来不純物との分離をも考慮した分離サイズ設計となっています。また、UB-100はラボ分取への利用などを見据え、27 µmの単分散粒子を採用により生体由来成分の高負荷下でのワークフローにも配慮した低圧運用を可能にしました。更に、高い再現性やキャリーオーバーの低減に不可欠なアルカリ洗浄に対応すべく、高アルカリ耐久性を兼ね揃えています。

微量・精密分析を主目的とする場合は水系SEC(GFC)用カラムOHpak SB-806 HQの分析例も参照ください。

Sample: 15 µL
Exosome from human plasma purification grade

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