我们使用生物纳米产品分析纯化用水溶性SEC(GFC)色谱柱UB-100与各种检测器组合,对来自人血浆的外泌体(EV)进行了分析。UV(280 nm)用于检测生物源性杂质整体,荧光(FL; Ex 280 nm / Em 348 nm)主要用于检测蛋白质(以Trp残基为指标),MALS散射(LS)特别对纳米粒子类别的大型目标产生高灵敏度的响应。此外,通过MALS可以得到目标的旋转半径(RMS radius)的估计值。
根据MALS的信息,大约13分钟附近是以外泌体(EV)为主要组分的区域,并且从RMS半径的信息可以推测分子大小存在分布。本次分析使用的来自人血浆的EV样品虽然是纯化级别的,但从UV、FL的分析结果来看,在EV区域之外也检测到了峰值,可以推测仍含有杂质。
UB-100不仅能够对以外泌体(EV)为主的50 nm以上的纳米产品进行分析纯化,以实现目标的分析,而且还兼顾了品质保证中非常重要的产物与生物源性杂质的分离。此外,UB-100考虑到了实验室规模的制备应用,通过采用27 µm的单分散粒子,实现了在分析生物源成分的高负荷工作流程中仍能保持低压。同时,UB-100具备高耐碱性,可以用碱清洗,从而提高再现性和减少拖尾效应。
进行微量、精密分析时,可以参考水溶性SEC(GFC)色谱柱OHpak SB-806 HQ的应用实例。
Sample: 15 µL
Exosome from human plasma purification grade

- Column
- :Shodex UB-100 (8.0 mm I.D. x 300 mm)
- Eluent
- :PBS (-)
- Flow rate
- :0.6 mL/min
- Detector
- :UV (280 nm) (small cell volume), Fluorescence (Ex. 280 nm, Em. 348 nm), MALS (Multi angle light scattering)
- Column temp.
- :Room temp.
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应用实例
- 样品负荷量 (KW-803)
- 流速的影响 (KW-802.5, KW-803)
- 标准蛋白质 (1) (KW-802.5)
- 标准蛋白质 (2) (KW-802.5 和 KW-803)
- 标准蛋白质 (14) (KW-802.5)
- 标准蛋白质 (15) (KW-803)
- 标准蛋白质 (16) (KW-804)
- 标准蛋白质 (18) (KW-803)
- 标准蛋白质 (19) (KW-804)
- 标准蛋白质 (23) (GF-510 HQ)
- 标准蛋白质 (24) (KW402.5-4F)
- 标准蛋白质 (25) (KW403-4F)
- 标准蛋白质 (26) (KW404-4F)
- 标准蛋白质 (27) (KW405-4F)
- 蛋白质回收率 (GF-310 HQ 和 GS-320 HQ)
- 蛋白质回收率 (KW-802.5 和 KW-803)
- 蛋白质回收率 (KW-803)
- 人血清蛋白 (3) (KW-803)
- BSA二聚体和三聚体
- 粗蛋白 (鸡蛋) (1) (KW-803)
- 天然脂肪氧化酶
- 天然过氧化氢酶
- 天然己糖激酶
- 人血清 (1) (SB-802 HQ)
- 人 IgG的胰蛋白消化酶
- 蛋白质混合物的色谱比较
- 蛋白质的分子量测定 (KW-803)
- KW402.5-4F 与 KW-802.5的比较
- 蛋白质的回收率 (KW402.5-4F, KW403-4F)
- 人体血清
- 酸奶中的乳清蛋白 (KW403-4F + KW402.5-4F)
- 血凝素蛋白
- 肽分析 (SEC)
- PEG化糜蛋白酶 (KW-802.5)
- PEG化天冬酰胺酶的SEC分析 (SB-806 HQ)
- 人 IgM (2)
- 多聚赖氨酸
- 抗生物素蛋白 (2)
- α1 酸性糖蛋白
- 明胶分析 (SB-806M HQ)
- 根据日本药典标准分析甘精胰岛素 (KW-802.5)
- 根据日本药典标准分析人体胰岛素 (KW-802.5)
- 根据药典标准分析冬门胰岛素 (KW-802.5)
- 根据USP-NF GENERAL CHAPTERS「<121.1> 胰岛素的物理化学分析流程」标准分析胰岛素 (KW-802.5)
- 标准蛋白质的SEC分离比较
- 多克隆抗体的SEC分离比较
- 单克隆抗体的SEC分离比较
- BSA低聚体分离比较 (LW-803, KW-803)
- 通过木瓜蛋白酶的消化监测人类单克隆IgG的分解过程 (LW-803)
- 血清脂蛋白分析 (KW-804)
- LW-403 4D和LW-803对标准蛋白质的分离比较
- 通过样品进样次数进行耐久性测试 (LW-403 4D)
- 根据USP-NF标准分析促红细胞生成素 (LW-803)
- 常规设备和半微量设备分析蛋白质的比较 (LW-403 4D)
- 常规设备和半微量设备分析IgG的比较 (LW-403 4D)
- B型肝炎病毒样颗粒(HBsAg VLP)的离子尺寸分布测定 (KW405-4F)
- 血蓝蛋白的分析 (KW405-4F)
- 根据EP标准分析生长激素 (LW-803)
- 利妥昔单抗的SEC分析 (LW-803)
- 诺如病毒样颗粒(VLP)的SEC/MALS分析 (SB-805 HQ)
- 诺如病毒样颗粒VLP的SEC/MALS分析 (2) (UB-50)
- 胸腺肽α1的分析 (KW-802.5)
- 外泌体的SEC/MALS分析 (SB-806 HQ)
- 补充剂中蛋白聚糖的分析 (SB-806M HQ)
- 根据USP-NF GENERAL CHAPTERS「<209> 低分子肝素的分子量测定」标准分析低分子量肝素 (KW-803 + KW-802.5)
- 根据GMJ法进行胶原蛋白肽的分子量分布测定 (KW-802.5)
