GF-310 HQカラムによるPEG混合物の溶離液組成による溶出挙動
水・有機溶媒両用SEC用カラムAsahipak
GF-310 HQを用いて溶離液中のメタノール/水の組成を変えてPEG(MW: 20000、4000、1000、400)およびエチレングリコール(EG)の混合物を測定し、クロマトグラムの比較を行いました(Fig.1)。
水100%の溶離液を使用した場合、PEG(MW: 4000、1000、400)はメタノール/水の溶離液を使用したクロマトグラムより溶出が遅れていることが分ります。 これは
GF-310 HQの充てん剤の疎水性に関係しています。 GF-310 HQ充てん剤は酢酸ビニル基を含む疎水性部分と水酸基を含む
親水性部分とから構成されています。 溶離液に水のみを使用すると充てん剤の極性と水の極性はFig.2のような関係になります。 このような条件ではPEGの疎水性部分と充てん剤の疎水性部分が疎水性相互作用を起こし逆相モードが働き、疎水性の高い試料ほど溶出が遅れます。
PEG(MW: 20000)は、充てん剤の穴に入ることが出来ない分子サイズのため、充てん剤の穴から排除され、充てん剤との接触面積が小さいため疎水性相互作用は働かずあまり保持されません。 次に、溶離液にメタノールを加えていくと溶離液の極性が充てん剤の極性と近くなります。 この場合、PEGと充てん剤の疎水性相互作用が抑えられSEC的に分離されます。 更にメタノールの量を増し溶離液をメタノール100%にすると充てん剤と溶離液の極性が逆転し順相モードが働くため、試料の極性部分と充てん剤の極性部(水酸基)との間に相互作用が働き極性の高い試料ほど溶出が遅れます。 溶離液にTHFを使用すると更に順相モードが強く働き、PEG混合物の溶出が遅れます。
参照:
GS-320 HQカラムによるPEG混合物の溶離液組成による溶出挙動

Sample : 0.1% each, 100μL
1.
Poly(ethylene glycol) (MW: 20,000)
2.
Poly(ethylene glycol) (MW: 4,000)
3.
Poly(ethylene glycol) (MW: 1,000)
4.
Poly(ethylene glycol) (MW: 400)
5.
EG, Ethylene glycol
Column : Shodex Asahipak GF-310 HQ (7.5mmID*300mm)
Detector : Shodex RI
Column temp. : 30℃