グルコース
それ自体が化学発光に関与しない物質の場合、酵素反応を介して過酸化水素(H
2O
2)に変換することが可能であれば化学発光検出することができます。
例えばグルコース自体は化学発光検出することができませんが、グルコースにグルコースオキシダーゼを作用させるとグルコン酸と
過酸化水素が生成します。 ここで生じた過酸化水素は直接発光でも間接発光でも高感度で検出することが可能です。
酵素固定化アフィニティクロマトグラフィ用カラムAFpak
AGO-494と化学発光検出器(CL)を用いて直接法で
グルコースを測定した例をご紹介します。
Sample : 1.
Glucose
Column : Shodex AFpak AGO-494 (4.6mmID*10mm)
Eluent : H2O
Reagent : 5mM Luminol + 5micro-M Hemoglobin in 0.1M Phosphate-Na
Flow rate : (Eluent); 0.2mL/min, (Reagent); 0.4mL/min
Detector : CL
Column temp. : 37℃