多糖類の吸着の影響

多糖類が含まれる試料をポリマー系アミノカラムAsahipak NH2P-50 4Eに注入すると多糖類が吸着し、ピークのブロード化や分離の悪化を引き起こす原因となります。　NH2P-50 4Eに分子量20万のプルランを吸着させ糖類の溶出の変化を見ますと、糖類の溶出容量はほとんど変化しませんが((A)参照)、理論段数が徐々に低下し((B)参照)、クロマトグラムにおいてもピークがテーリングしていることが分かります((C)参照)。　1度カラムに吸着した多糖類を完全に取り除くのは因難ですので、試料中に多糖類の混在が予想される場合は、前処理等であらかじめ多糖類を除去しておくことが重要です。



Sample : Maltose, Lactose, Sucrose, Glucose, Fructose

Column       : hodex Asahipak NH2P-50 4E (4.6mmID*250mm)
Eluent       : CH3CN/10mM *Tetrapropylammonium buffer(pH10.0)=75/25
Flow rate    : 1.0mL/min
Detector     : Shodex RI
Column temp. : 30℃

^*テトラプロピルアンモニウムバッファーの作り方
10mM 水酸化テトラプロピルアンモニウムに酢酸を添加してｐHを10.0に調整して下さい。