溶離液pHの影響 (DEAE-825)

弱陰イオン交換クロマトグラフィ用カラムIEC DEAE-825を用いたタンパク質の分離におけるpHの影響を調べました。　酸性溶離液の場合、4種のタンパク質は良く分離しています。　アルカリ性溶離液では分離が悪く、pHが上るに従い4本のピークは1本にまとまる傾向を示しています。　これは充てん剤のイオン交換基が、pHが高い状態では充分にイオンに解離しなくなるからです。


Sample:
1. Conalbumin
2. Transferrin
3. Ovalbumin
4. Trypsin inhibitor

Column    : Shodex IEC DEAE-825 (8.0mmID*75mm)
Eluent    : (A); 20mM Piperazine-HCl buffer(pH6.0)
                 20mM Tris-Trispropanol-HCl buffer(pH7.0)
                 20mM Tris-HCl buffer(pH8.0)
                 20mM Ethanolamine-HCl buffer(pH9.0)
                 20mM 1,3-Diaminopropane-HCl buffer(pH10.0)
            (B); (A) + 0.5M NaCl
            Linear gradient: 0min to 20min, (A) to (B)
Flow rate : 1.0mL/min