ヒアルロン酸のSEC/MALS (濃度依存性)

一般に水溶性高分子には粘度の高いものが多くサイズ排除モード(SEC)分析では、濃度依存性がでやすいサンプルです。　ここでは、濃度が0.05%と0.10%のヒアルロン酸をSECと多角度光散乱検出器(MALS)分析し分離挙動を比較しました。　上図はMALSで測定した分子サイズ(RMS半径)と溶出容量をプロットしたものでクロマトグラムはRI検出器の信号です。　溶出容量のずれは、0.10%での高分子成分の溶出遅れに起因していると考えられます。　下の図は測定された分子量とRMS半径の関係をプロットしたものですが、ここでは濃度による差異はありません。　0.10%での高分子成分の溶出の遅れは平均分子量、分子サイズの測定値にはほとんど影響しませんので、SEC/MALSを用いると分離挙動の推察が可能となります。



Sample : Hyaluronic acid 0.10%（blue), 0.05%(red), 50μL each

Columns   : Shodex OHpak SB-806 HQ (8.0mmID*300mm) x 2
Eluent    : 100mM　NaNO3 aq.
Flow Rate : 1.0ml/min
Detector  : MALS(Multi angle laser light scattering), Shodex RI
　
(Result)
0.10% : Mw = 1015K, RMS radius = 147.3 nm     
0.05% : Mw = 1115K, RMS redius = 149.8 nm