タンパク質/アグリゲーション(凝集体)の検出
溶液中のタンパク質の特性解析はいろいろな分野において非常に重要なことです。
製薬や生化学の分野において、タンパク質をベースにした製品には凝集体が存在しないことが必要です。
多角度光散乱検出器(MALS)は、溶液中のタンパク質の分子量(Mw)測定に非常に有効な手段であり、凝集状態を調べるにも高感度測定が可能です。 また光散乱の応答は、測定されるサンプルの分子量(Mw)に濃度を掛けたものに直接比例するので、凝集体の形成量を高感度検出するのに最適な方法です。MALSを用いればタンパク質のモノマー、ダイマー、そして更に大きなアグリゲーションの存在を簡単に確認できます。
図1:牛血清アルブミン(
Bovine serum albumin, BSA)のminiDAWN(r)の90°出力(LS2)と屈折率検出器の出力(AUX1)
を比較したものです。 アグリゲート(ダイマー、トライマー)がはっきりと検出されています。
図2:人血清アルブミン(Human serum
albumin)のデバイプロットです。 3角度各々の光散乱強度を示しています。 分子量だけでなくサイズ(根平均二乗半径)も測定可能です。 スライスラインで示された凝集体のMwは3.8×10g/mol、慣性半径は53nmです。
Columns : Shodex PROTEIN KW-804 + KW-803 (8.0mmID*300mm each)
Eluent : 50mM Phosphate buffer + 0.1M NaCl
Flow rate : 1.0mL/min
Detector : MALS(Multi angle laser light scattering), RI