流动相的选择方法 (YK-421)

1. 5 mM 酒石酸 + 1 mM 吡啶二羧酸 + 1.5 g/L 硼酸
使用 5 mM 酒石酸 + 1 mM 吡啶二羧酸 + 1.5 g/L 硼酸作为流动相可以使样品中含量很多的Na+, NH4+, K+, Ca2+和Mg2+等金属离子不受过度金属离子的影响,最迅速的被分离开。过渡金属离子除了Mn2+外,都在Vo的位置被洗脱。 改变流动相的浓度可以进行微调整。
溶剂的调整方法请看考如下 :
* 酒石酸---------通常使用5 mM的浓度。把流动相中就是酸的浓度提高1~2 mM,所有的离子洗脱变快。
* 吡啶二羧酸---通常使用1 mM的浓度。2价离子,特别是Ca2+的洗脱变快。 当色谱柱温度在50 ℃时,Sr2+, Ba2+的洗脱变快。
* 硼酸------------通常添加量为1.5 g/L。 基本上不影响分离效果,能改善流动相的保存性,使之可以连续使用2~3周。

(溶剂的配制方法)
1) 称量0.750 g色谱级酒石酸、0.167 g色谱级吡啶二羧酸和1.5 g色谱级的硼酸,至于1 L容量瓶中。
2) 加纯水至1 L。
3) 超声波溶剂。
4) 使用0.2 μm膜过滤器过滤。
(注意)由于酒石酸极易变质,所以请在使用前配置流动相。

2. 添加冠醚
为了改善Na+和 NH4+的分离,可以在流动相中添加冠醚。
举例:Na+和 NH4+ 的浓度比例在300:1的血清样品,可以被很好分离。

3. 添加乙腈
由于乙腈添加的上限为70 %,所以把分离对象由原先的无极阳离子、短链烷基胺和乙醇胺扩展到了长链的烷基胺。

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